抑制性消减杂交(SSH)技术服务
一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。所以寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因。基于抑制性消减杂交(SSH)的方法构建cDNA文库是近年来发展起来的进行功能基因组学研究,寻找差异基因的一种非常有效的方法,该技术克服了消减杂交技术无法克隆低丰度表达基因的缺陷,并且降低了假阳性率,相对于其它差异显示技术具有很大的优越性。
操作程序
1.由您提供相关背景材料以供参考。
2.签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等。您需要预付实验总费用的80%作为实验预付款。
3.由您提供实验所需的足够量的样品,本公司不接受您提供的RNA样品,除非您有足够的证据证明所提供的RNA没有问题。
4.进行RNA的抽提,抑制性消减杂交按照BD Clontech的PCR-SelectTM cDNA Subtraction Kit操作步骤进行。
5.将扩增号的具有差别表达的序列片段克隆到T载体并转化大肠杆菌。
6.随机挑取24个阳性克隆进行PCR验证。
7.提供实验报告及构建于T载体的差异文库(涂布后的平板)。
收费标准和服务期限
服务内容 收费标准 工作日
性消减杂交 35000元 20工作日
从基因水平分析的实验总体路线
差减文库构建实验流程